簡(jiǎn)介

越來(lái)越多的農場(chǎng)動(dòng)物（牛、綿羊、山羊和豬）被用于實(shí)驗研究。不同于其他常用實(shí)驗動(dòng)物品種，農場(chǎng)動(dòng)物通常不是標準化的實(shí)驗動(dòng)物，多購自于農場(chǎng)或其他養殖來(lái)源。考慮到農場(chǎng)動(dòng)物來(lái)源廣泛，生產(chǎn)機構和使用機構之間差異較大，同時(shí)，農場(chǎng)動(dòng)物也會(huì )攜帶人畜共患病原，進(jìn)而影響使用機構的職業(yè)健康問(wèn)題。因此針對農場(chǎng)動(dòng)物的健康管理是一項非常復雜和具有挑戰性的任務(wù)。

本文旨在以批判性的思維，幫助動(dòng)物使用機構做出專(zhuān)業(yè)和明智的決策，而非建立一個(gè)詳盡所有已知病原體的排除清單。確定健康管理和監測方案應是規劃未來(lái)研究的先決條件。而一個(gè)有效且全面的健康管理和監測方案則依賴(lài)于主治獸醫的專(zhuān)業(yè)判斷，主治獸醫應該有足夠的權力采取適當的行動(dòng)，并有良好的溝通技巧。

農場(chǎng)動(dòng)物健康管理一般資料

出于現實(shí)和經(jīng)濟原因，當需要一個(gè)全面的健康定義時(shí)，絕大多數用于研究的動(dòng)物都不是“無(wú)菌的”，而是包含一個(gè)詳盡的駐留（或檢測陽(yáng)性）微生物群。該微生物群可包括任何傳染性、機會(huì )性或共生的微生物。因此，通常會(huì )根據需要“排除的微生物清單”對動(dòng)物健康狀況進(jìn)行定義。因此，了解病原體監測清單和排除清單之間的區別是很重要的。監測清單可以純粹提供信息，并可能包括對常駐微生物群的監測，以表明生物排斥預防措施的有效性。排除清單具有更直接的科學(xué)重要性，因為如果發(fā)現了陽(yáng)性病原體檢測結果，這可能會(huì )使實(shí)驗結果無(wú)效，并可能導致大規模的病原體清除計劃出現，甚至出于倫理、操作和經(jīng)濟原因替換種群。

動(dòng)物健康管理應考慮的主要因素有：

1）合適的動(dòng)物“健康標準”或“微生物狀況”。這意味著(zhù)不存在特定的致病微生物，而存在與動(dòng)物模型所需特征完全一致的相關(guān)微生物群。這包括其與研究應用相關(guān)的特異性和非特異性免疫能力，以保證沒(méi)有干擾因素。必須制定生物安全保障措施和健康監測計劃，以核實(shí)有關(guān)動(dòng)物的特定健康標準

2）制定檢測計劃。根據動(dòng)物使用機構的需求，確定檢測范圍：整個(gè)畜群/代表性樣本量/入圍供應的動(dòng)物等。對畜群或動(dòng)物種群進(jìn)行健康監測的性質(zhì)、樣本量和頻率應定制化，并應考慮到諸如動(dòng)物的來(lái)源、飼養條件、健康管理程序(硬件和軟件管理)、種群歷史污染和潛在污染風(fēng)險、動(dòng)物的預期研究用途、相關(guān)的病原體排除清單等因素。

3）與各種供應商（動(dòng)物、物料、設備、服務(wù)等）或研究伙伴有清晰的溝通和良好的合作。強烈建議確保動(dòng)物供應商不僅應遵守現行法規，還應遵守相關(guān)質(zhì)量管理要求，提供充足的資源，并在程序實(shí)施的各個(gè)方面遵守動(dòng)物福利原則。這可以通過(guò)參觀(guān)/審計設施和/或資質(zhì)認證（如AAALAC認證）來(lái)實(shí)現或確認。由于生產(chǎn)機構的飼養條件和飼養管理能力可能會(huì )影響動(dòng)物模型和研究結果，因此生產(chǎn)機構的專(zhuān)業(yè)程度對動(dòng)物使用機構也是非常重要的。與生產(chǎn)機構建立真正的伙伴關(guān)系非常重要。

4）操作人員經(jīng)過(guò)完善的培訓，對相關(guān)物種有豐富的經(jīng)驗。

質(zhì)量和技術(shù)保障協(xié)議：

強烈建議與生產(chǎn)機構簽訂質(zhì)量和技術(shù)保障協(xié)議。質(zhì)量和技術(shù)保障協(xié)議是一份合同文件，用于協(xié)商規定使用機構和生產(chǎn)機構（供應商）之間關(guān)于動(dòng)物飼養管理、檢測和質(zhì)量保障操作等的“質(zhì)量”要求和“技術(shù)”要求。它是根據使用機構的需求建立的，包括動(dòng)物福利的要求，以及雙方的承諾和義務(wù)，還包括如責任、資源、溝通、文件、變更控制、偏差和投訴管理、審計等所有關(guān)鍵事項。

動(dòng)物采購的健康管理考慮因素

從指定種群采購動(dòng)物：

1）一般原則

每個(gè)專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)機構或使用機構應建立和驗證一個(gè)或多或少具有限制性的“高可信度健康等級”（代指使用機構和/或生產(chǎn)機構制定的高級別動(dòng)物健康等級）的定義，以確保動(dòng)物健康狀況符合其用途，并明確用于控制排除和監測動(dòng)物微生物狀況的方法（Figure 1）。

在排除清單上，應標明根據國標、行標等規定的病原體，因為可以通過(guò)其他途徑確認動(dòng)物健康狀況。應該關(guān)注動(dòng)物攜帶病原體的風(fēng)險，這些動(dòng)物可能攜帶（或間歇性排毒）致病類(lèi)、寄生蟲(chóng)類(lèi)或人畜共患類(lèi)病原體，但動(dòng)物本身沒(méi)有表現出任何臨床癥狀或損傷。因此，動(dòng)物健康檢測計劃應包括血清學(xué)和/或直接檢測病原體的方法。

專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)機構應提供：（a）病原體監測清單、檢測頻率、抽樣策略和方法；（b）病原體排除清單，為每個(gè)可能被檢測到陽(yáng)性的病原體提供預案。例如，如果陽(yáng)性病原體具有致病性或可能?chē)乐馗蓴_科學(xué)使用，預案可包括立即淘汰或凈化種群;如果陽(yáng)性病原體對種群的影響有限，可延遲或有計劃的重建種群；如果感染了機會(huì )病原體，對實(shí)驗項目或研究活動(dòng)的影響很小，可能不需要采取行動(dòng)。

有些研究可能需要使用不含特定抗體的動(dòng)物，例如獸醫疫苗的研發(fā)和傳染病的研究。在這種情況下，血清學(xué)檢查不僅能夠監測繁殖種群中病原體是否存在，也是某些類(lèi)別疫苗有效性和安全性研究的先決條件。

2）健康管理和監控抽樣程序

不同種群（包括同一個(gè)生產(chǎn)機構的不同種群）的飼養管理條件不同，因此，病原體感染發(fā)生率也可能不同。每個(gè)機構應根據適用的政府法律、法規和機構政策制定農業(yè)動(dòng)物飼養管理和使用方案，并明確指定權限。生產(chǎn)機構之間，以及生產(chǎn)機構不同設施之間，設施環(huán)境和病原體情況差異可能很大，并可能影響研究結果。

3）病原體排除和健康監測

為維持既定的健康標準，需要合理實(shí)施全面的“病原體排除”方案，以實(shí)現動(dòng)物種群的“零污染”。它需要良好的設施設計，包括地板、墻壁、天花板、房屋、籠具和搬運設備的表面，以及合理且完善的人員資質(zhì)和培訓體系。應制定健康監測方案，不斷評估并合理執行。病原體狀況未知或受污染的動(dòng)物應進(jìn)行適當檢疫或隔離，并采取適當的安全措施，以防止不良或危險的傳染源傳播給潔凈的動(dòng)物或人類(lèi)。

4）種群淘汰和凈化政策

在某些情況下，有必要淘汰或重新凈化種群。例如：

a：當陽(yáng)性病原體感染，影響動(dòng)物健康和福利，或影響研究相關(guān)的關(guān)鍵指標時(shí)，應盡快決定。最合適的操作取決于要消除的病原體的數量和性質(zhì)，以及動(dòng)物的預期用途。在病原體從動(dòng)物傳播到動(dòng)物的情況下，僅淘汰檢測呈陽(yáng)性的動(dòng)物可能無(wú)法有效地從種群中消除病原體(盡管它可能大大降低感染比例和流行率)。如果病原體是通過(guò)媒介(如昆蟲(chóng))傳播的，那么淘汰檢測呈陽(yáng)性的動(dòng)物可能就足夠了（只有在媒介也被消除的情況下）。

b：如果有治療/預防措施可以消除病原體，在陽(yáng)性病原體的少量感染，不產(chǎn)生明顯的病理和不影響關(guān)鍵的研究指標的情況下，則不必急切淘汰或凈化種群。應評估治療的可能結果。

從農場(chǎng)采購動(dòng)物（農場(chǎng)供應商）：

任何疾病進(jìn)程——無(wú)論是營(yíng)養性、環(huán)境性、腫瘤性還是感染性——都需要加以控制。鑒于農場(chǎng)的生產(chǎn)環(huán)境相對不受控制，其生產(chǎn)的集約化性質(zhì)，控制這些因素比嚙齒動(dòng)物要困難得多。

對農場(chǎng)進(jìn)行全面審查是必要的，審查內容包括農場(chǎng)管理、任何現場(chǎng)相關(guān)疾病、動(dòng)物定期臨床檢查等，以確保提供健康的動(dòng)物。此外，農場(chǎng)動(dòng)物的典型壽命受限于它們的使用目的。如果為了研究目的，動(dòng)物可能需要被飼養更長(cháng)的時(shí)間，可能會(huì )出現不常見(jiàn)的臨床觀(guān)察或病變。

1）農場(chǎng)供應商的選擇標準

農場(chǎng)環(huán)境可能因其主要活動(dòng)（遺傳選擇、育種、生長(cháng)）、位置、室外或室內飼養等而有很大差異。應進(jìn)行農場(chǎng)現場(chǎng)審查。第一次現場(chǎng)審查是非常重要的，以便檢查動(dòng)物是如何飼養管理的，生物安全措施到位，并提出可能與動(dòng)物的具體用途有關(guān)的問(wèn)題。如果使用機構決定與養殖場(chǎng)合作，則應定期進(jìn)行審查，并應準備并落實(shí)合作協(xié)議。在相關(guān)情況下，合作協(xié)議可包括使用機構的技術(shù)支持，允許改善動(dòng)物飼養條件和工作方式。

評估潛在供應商時(shí)應考慮的關(guān)鍵指標是：

a：設施類(lèi)型和動(dòng)物飼養條件，以及生產(chǎn)機構的生物安全措施（控制野生動(dòng)物和害蟲(chóng)，動(dòng)物的流向，清潔和消毒程序等）；

b：農場(chǎng)的歷史健康狀況以及所進(jìn)行檢查的數量和類(lèi)型（畜群健康監測計劃，包括臨床檢查信息，身體狀況評分（BCS））；

c：核實(shí)飼養者是否引進(jìn)新動(dòng)物（來(lái)自其他供應商）或生物材料，引進(jìn)頻率，以及相應的健康檢查報告；

d：農場(chǎng)與動(dòng)物使用機構的距離；

e：提供必要時(shí)將動(dòng)物隔離的設施（檢疫、治療等）；

f：檢查動(dòng)物的運輸方式，和從裝載到交付的時(shí)間周期;

g：明確和透明的溝通和相互信任是良好合作的必要條件（任何影響動(dòng)物和種群管理的重大事件都應向使用機構報告）；

h：在雙方簽署的合作協(xié)議中正式確定對動(dòng)物的要求，這有助于確定相互的責任，明確未來(lái)的溝通，并有助于進(jìn)行定期審查（Figure 2）；

i：農場(chǎng)的能力-在要求的時(shí)間內交付合格動(dòng)物數量的能力。

使用機構的獸醫應對每個(gè)潛在生產(chǎn)供應商的健康管理體系進(jìn)行評審，其目的是評估當前的健康和福利狀況，最好是與農場(chǎng)獸醫一起進(jìn)行評審。

應審查的共同文件包括：（a）畜群健康計劃，（b）農場(chǎng)生物安全政策，（c）農場(chǎng)可能持有的任何特定/官方健康資質(zhì)和相關(guān)記錄，以及（d）與使用獸藥有關(guān)的記錄。

2）動(dòng)物選擇的標準

在確定或實(shí)施針對畜群的健康監測方案后，才可以進(jìn)行對動(dòng)物的個(gè)別評估。最重要的是，被篩選的動(dòng)物應無(wú)任何臨床疾病，一般狀況良好。在動(dòng)物篩選的第一階段，由獸醫對動(dòng)物進(jìn)行完善的臨床檢查以及BCS評分，能夠提供非常有價(jià)值的信息。也可要求提供動(dòng)物體重數據/采食量數據。可進(jìn)行各種個(gè)體健康篩查監測，以進(jìn)一步評估動(dòng)物是否有持續的亞臨床健康問(wèn)題或感染，這些問(wèn)題或感染可能會(huì )影響下游研究。篩查類(lèi)型可分為兩類(lèi)：（a）一般健康篩查和（b）特定病原體篩查。

（a）：一般健康檢查

一套完整的臨床檢查，能夠發(fā)現臨床檢查異常癥狀和易發(fā)疾病的危險因素，可以用于安排進(jìn)一步的檢查。完整的臨床檢查將包括：被檢查動(dòng)物的病史，農場(chǎng)動(dòng)物的疾病歷史，對環(huán)境的觀(guān)察，對動(dòng)物進(jìn)行遠距離觀(guān)察，詳細觀(guān)察動(dòng)物并檢查所選的動(dòng)物群體。動(dòng)物應從鼻子到尾巴進(jìn)行檢查，使用檢查、觸診和聽(tīng)診。

臨床檢查應以嚴格統一的方式進(jìn)行，并記錄在動(dòng)物個(gè)體評估表上，檢查項目如下：

身體姿勢；

頭部的檢查和觸診（包括下頜骨、牙齒和口腔）、頸部、左胸腹、右胸腹、尾端、陰道檢查、直腸檢查、乳房或雄性動(dòng)物的外生殖器；

糞便的一致性（成形或光滑、顏色、氣味、肛門(mén)區域和臟尾巴）；

肺部聽(tīng)診心臟和胃/腸；

心臟和呼吸頻率；

呼吸類(lèi)型（腹部/肋部）；

運動(dòng)對稱(chēng)性；

BCS評分。BCS是畜群管理的重要工具。豬的BCS是基于對肋骨、臀部和脊柱的觸診，BCS從1（過(guò)瘦）到5（過(guò)胖）不等。

除了特定病原體檢測外，通過(guò)檢查動(dòng)物的血液學(xué)/生化狀態(tài)，例如通過(guò)分析為特定疾病調查而采集的血液樣本，評估動(dòng)物的生理健康可能是有用的。血液學(xué)和生化檔案不僅可以發(fā)現未檢測到的持續感染過(guò)程的證據，還可以檢測到其他生理紊亂。

參考文獻：

Caristo M E ,  Ferrara F ,  Hardy P , et al. Federation of European Laboratory Animal Science Associations recommendations of best practices for the health management of ruminants and pigs used for scientific and educational purposes[J]. Laboratory Animals, 2021(2).