在本號前文《屏障不等于SPF》中我們介紹了無(wú)特定病原體 (SPF：Specific Pathogen Free) 是一個(gè)修飾動(dòng)物所攜帶微生物狀況的修飾詞。其定義依據國標GB14922.2—2010《實(shí)驗動(dòng)物微生物學(xué)等級及監測》可理解為：“根據實(shí)驗需要在清潔級動(dòng)物約定所必須排除病原體列表基礎上，還需排除那些可能干擾實(shí)驗進(jìn)行或結果的特定微生物。”

GB14922.2—2010不僅給出了包括SPF級實(shí)驗動(dòng)物在內的不同微生物等級實(shí)驗動(dòng)物的定義，還為它們所必須排除微生物列表做了嚴格的規定。以SPF級小鼠為例，其必須排除微生物列表中就包括了以沙門(mén)菌和綠膿桿菌為代表的16種“病原菌”及以漢坦病毒和鼠肝炎為代表的11種病毒。這個(gè)排除列表中的微生物，從致病角度可以分為三類(lèi)。

第一類(lèi)是人獸共患病原體，動(dòng)物感染后可能發(fā)病也可能只是攜帶者，但卻嚴重威脅人類(lèi)健康，如鼠疫耶爾森菌、漢坦病毒和淋巴細胞脈絡(luò )從腦膜炎病毒等；

第二類(lèi)是可對實(shí)驗動(dòng)物健康和生存質(zhì)量構成嚴重威脅的病原體，如鼠痘和鼠肝炎病毒等；

第三類(lèi)是指通常情況下為隱性或共生感染，對動(dòng)物的生存和健康不產(chǎn)生影響，甚至有益，但對免疫缺陷動(dòng)物、或在開(kāi)展免疫抑制相關(guān)實(shí)驗及其它特定研究時(shí)表現為顯性感染，或因改變動(dòng)物生理狀態(tài)而影響實(shí)驗結果的“病原體”，通常被稱(chēng)作條件致病微生物。 

從實(shí)驗動(dòng)物從業(yè)人員職業(yè)健康、生物安全及實(shí)驗動(dòng)物福利和確保科學(xué)研究準確性上考量，強制要求所有機構都必須排除人獸共患、嚴重危害實(shí)驗動(dòng)物健康和生存質(zhì)量的病原體是必要的，也是可以接受且必須做到的。但對那些在特定條件下才會(huì )對動(dòng)物健康和生存質(zhì)量產(chǎn)生危害或干擾實(shí)驗結果的條件致病微生物也一刀切式地要求所有機構都強制排除就值得商榷了。

 不同的機構有不同的科學(xué)或服務(wù)目標，對于那些主要以免疫缺陷動(dòng)物為主如開(kāi)展腫瘤和免疫機制研究的機構，設置一個(gè)包含所有潛在影響動(dòng)物健康和實(shí)驗結果的SPF級實(shí)驗動(dòng)物排除列表是必要的。而對那些主要以使用免疫功能健全小鼠開(kāi)展如行為學(xué)研究和生殖生物學(xué)研究的動(dòng)物設施，也強制要求排除諸如綠膿桿菌、噬肺巴斯德桿菌和肺炎克雷伯菌等條件致病微生物顯然毫無(wú)必要。因為上述條件致病微生物的存在既不會(huì )對這些動(dòng)物的健康造成危害，也不會(huì )干擾其研究結果。

 反之，在強制要求排除的政策指導下，為了控制這些條件致病微生物進(jìn)入設施而采取的一些管理措施，不僅會(huì )增加機構日常管理的壓力，甚至還會(huì )改變動(dòng)物的正常生理狀態(tài)和腸道菌群結構，如為了控制綠膿桿菌，給動(dòng)物喝酸化水。而一旦設施中出現上述微生物，在強制要求排除政策的指導下，機構不得不通過(guò)撲殺污染動(dòng)物和剖腹產(chǎn)或胚胎移植等凈化措施來(lái)清除這些所謂的“污染”。這樣的操作不僅增加了機構經(jīng)濟負擔，同時(shí)撲殺能夠實(shí)現科學(xué)目標的實(shí)驗動(dòng)物顯然也違反了動(dòng)物福利原則。反之隨著(zhù)科學(xué)的發(fā)展，一些已被證明對動(dòng)物的健康和實(shí)驗結果有嚴重的影響和干擾的微生物，如本號前文介紹過(guò)的螺桿菌和小鼠腎細小病毒等（詳見(jiàn)本號前文《藥典“新寵”螺桿菌》和《一種新病毒能否解決慢性腎病的造模問(wèn)題》）卻不在國標約定SPF實(shí)驗動(dòng)物固定排除列表中，這反映了一刀切式的固定排除列表的僵化和滯后。

 因此，為所有實(shí)驗動(dòng)物設施設置一個(gè)固定的SPF排除列表既不科學(xué)也不經(jīng)濟，甚至還會(huì )違反動(dòng)物福利。每個(gè)動(dòng)物設施的科研和服務(wù)目標及其所面對的潛在污染威脅都不盡相同，所以SPF排除列表也應隨之而變，甚至在不同的時(shí)期設置不同的排除列表，而不是簡(jiǎn)單粗暴地只是設置一個(gè)固定的排除列表。因為科學(xué)真正需要的是無(wú)特定病原體動(dòng)物而非無(wú)固定病原體動(dòng)物。

據說(shuō)《實(shí)驗動(dòng)物微生物學(xué)等級及監測》有了更新的版本，即將在7月1日發(fā)布，本號將會(huì )繼續跟進(jìn)并解讀這一話(huà)題。

參考文獻

1.中華人民共和國國家標準 GB 14922.2-2010 《實(shí)驗動(dòng)物微生物學(xué)等級及監測》

2.The acidified drinking water-induced changes in the behavior and gut microbiota of wild-type mice depend on the acidification mode. Sci Rep. 2021 Feb 3;11(1):2877