新版國標解讀2023

經(jīng)過(guò)多年的醞釀，新版的《實(shí)驗動(dòng)物 微生物、寄生蟲(chóng)學(xué)等級及監測》國家標準已于本月（2023年07月01日）開(kāi)始實(shí)施。本次國標修訂內容中最大的看點(diǎn)就是去除了清潔級動(dòng)物這一概念和等級劃分，與此同時(shí)從總量上減少了原國標約定的無(wú)特定病原體（SPF）級動(dòng)物檢測的微生物數量，并減少了必檢項目。同時(shí)，針對免疫缺陷小鼠增加了兩個(gè)檢測項目。有關(guān)新版國標的詳細解讀可參照蘇州西山生物技術(shù)有限公司郭連香副總經(jīng)理在華東地區第十六屆實(shí)驗動(dòng)物科學(xué)學(xué)術(shù)交流會(huì )上的演講文稿（本公眾號將擇期推送）。

顯然國標對實(shí)驗動(dòng)物行業(yè)有著(zhù)特殊的指導意義。那么有了國標是不是就足夠了呢？從業(yè)人員當如何理解和運用國標并進(jìn)一步提升實(shí)驗動(dòng)物設施管理水平呢？首先，從業(yè)人員應該了解國標所設立檢測項目的科學(xué)依據是什么，即為什么要約定一些微生物必須排除，而另一些微生物只需在必要時(shí)排除？

國標必須排除的第一大類(lèi)病原體是那些對實(shí)驗動(dòng)物和從業(yè)人員都存在健康威脅的微生物，如結核桿菌、漢坦病毒和淋巴細胞脈絡(luò )叢腦膜炎病毒等。但即便是這些病原微生物，在監測上也會(huì )根據其流行狀況高低做出調整，如淋巴細胞脈絡(luò )叢腦膜炎病毒因其已經(jīng)很少出現而被劃為必要時(shí)檢測項目。其次，國標必須排除微生物列表還包含了嚴重危害實(shí)驗動(dòng)物健康的病原微生物，如小鼠肝炎病毒，仙臺病毒和螨蟲(chóng)等。以上兩大類(lèi)病原微生物的排除都很好理解，即不能對從業(yè)人員和動(dòng)物健康造成威脅，因此作為必須排除項毫無(wú)爭議。某種病原微生物是否作為必檢或必要時(shí)檢測項目一般是依據目前的流行狀態(tài)而定，如果流行可能性極低，則可作為必要時(shí)檢測項目，甚至會(huì )從清單中刪除（不強制要求檢測），例如此前作為小鼠和大鼠必要時(shí)檢測項目的“假結核耶爾森菌”，由于多年未有檢出，目前已經(jīng)刪除。

隨著(zhù)科技的不斷發(fā)展，另發(fā)現一些微生物，在通常情況下為隱性或共生感染，對動(dòng)物的生存和健康不產(chǎn)生影響，但對免疫缺陷動(dòng)物、或在開(kāi)展免疫抑制相關(guān)實(shí)驗及其它特定研究時(shí)表現為顯性感染，或因改變動(dòng)物生理狀態(tài)而影響實(shí)驗結果，如綠膿桿菌、肺炎克雷伯菌、嗜肺巴斯德桿菌等，這類(lèi)微生物通常被稱(chēng)為條件致病微生物。這些微生物是否需要排除就不能一概而論了。舊版國標把很多條件致病微生物也放在必須排除列表，且為必檢項目，既不科學(xué)，很多時(shí)候也沒(méi)必要。相對于舊版國標中SPF級動(dòng)物必檢微生物列表中包含多個(gè)條件致病微生物，新版國標中雖仍有部分條件致病微生物（如綠膿桿菌）被保留下來(lái)，但已經(jīng)做了刪減，例如，將金黃色葡萄球菌從必檢項調整為必要時(shí)檢測項。這在一定程度上體現了“將國標作為實(shí)驗動(dòng)物微生物質(zhì)量控制的基本要求，由各實(shí)驗動(dòng)物生產(chǎn)和使用單位根據自己的實(shí)際需求，設立適合本機構科研或生產(chǎn)目標的SPF級動(dòng)物必須排除列表”這一國際通用的行業(yè)管理規范。

涉及實(shí)驗動(dòng)物的生物醫學(xué)研究種類(lèi)繁多，因此對能接受實(shí)驗動(dòng)物所攜帶微生物的范圍，尤其是那些條件致病微生物的范圍是不同的。如果某科研機構的科研定位是以使用免疫缺陷小鼠開(kāi)展腫瘤移植實(shí)驗，就應該將新國標中新增的必要時(shí)檢測項目牛棒狀桿菌列入其SPF級動(dòng)物必須排除微生物列表。因為牛棒狀桿菌感染會(huì )嚴重影響免疫缺陷小鼠的健康。如裸鼠感染牛棒狀桿菌會(huì )出現皮膚干燥、脫水、鱗屑和體重減輕等癥狀，而重度聯(lián)合免疫缺陷小鼠感染牛棒狀桿菌會(huì )出現脫毛甚至死亡。而在以C57BL/6和DBA/2的雜交一代小鼠為實(shí)驗對象開(kāi)展的胚胎移植相關(guān)實(shí)驗的機構，就不一定要將牛棒狀桿菌列入SPF級動(dòng)物必須排除微生物。這是因為免疫健全動(dòng)物通常不會(huì )感染牛棒狀桿菌或僅僅是一過(guò)性感染，也不會(huì )對實(shí)驗結果產(chǎn)生干擾。

上面的例子告訴我們，定義一種一刀切的SPF動(dòng)物必須排除微生物列表既不經(jīng)濟又不現實(shí)，且缺少可操作性。同時(shí)，凈化撲殺攜帶對相關(guān)科學(xué)研究和動(dòng)物健康無(wú)影響的條件致病微生物的實(shí)驗動(dòng)物也嚴重違反動(dòng)物福利。因此，新國標減少了SPF級實(shí)驗動(dòng)物必須排除微生物必檢項目，為機構設置符合自己科研需求的SPF必須排除微生物列表提供了更大的靈活度，這是一大進(jìn)步。但這并不意味著(zhù)機構僅設置國標約定的最小SPF必須排除微生物列表即可。使用機構應根據自己所開(kāi)展的科學(xué)研究需要，在國標基礎上設置自己的SPF必須排除微生物列表，排除那些已經(jīng)被證明危害其所用實(shí)驗動(dòng)物健康（如免疫缺陷小鼠）和對其實(shí)驗結果存在干擾的條件致病微生物。這是科學(xué)研究可靠性及可重復性的保證，因此也是科學(xué)工作者必須堅守的底線(xiàn)。一些有條件的機構，甚至可以根據自己的設施能力設置不同的SPF必須排除微生物列表，以滿(mǎn)足自身多樣的科研需求。

本次新版國標也給實(shí)驗動(dòng)物生產(chǎn)單位提供了新的契機，生產(chǎn)單位完全可以依據市場(chǎng)需求設立從多到少的不同SPF級動(dòng)物必須排除列表，以滿(mǎn)足不同使用單位的需求。當然，不同排除列表的SPF級動(dòng)物價(jià)格上也理應有相應體現，排除微生物種類(lèi)多的動(dòng)物顯然要貴一些，以體現其價(jià)值。而生產(chǎn)單位是否這樣做，還要看使用單位的需求。使用單位可以推動(dòng)生產(chǎn)單位提升其SPF級動(dòng)物的標準和規格。國標并沒(méi)有對生產(chǎn)單位提出單獨的強制高標準嚴要求，而把這個(gè)任務(wù)交給市場(chǎng)，這或許是一個(gè)更好的選擇。生產(chǎn)企業(yè)要生產(chǎn)什么樣的動(dòng)物，完全是依據市場(chǎng)上的用戶(hù)是否有這樣的需求和有這樣需求的客戶(hù)群體的大小來(lái)決定。

此外，由于標準的特點(diǎn)，并沒(méi)有對實(shí)驗動(dòng)物微生物質(zhì)量控制過(guò)程中涉及到的重要節點(diǎn)加以詳細闡述。例如，如何針對機構的設施進(jìn)行風(fēng)險評估并設置更適合機構自身的必須排除微生物清單，如何正確設置哨兵鼠，如何正確使用多種監測方案互相彌補各自的缺點(diǎn)，出現陽(yáng)性后如何確認和處置等等。要解決這些問(wèn)題，還需組織更多的培訓，設施間也可以通過(guò)交流相互分享管理經(jīng)驗，共同提高我國實(shí)驗動(dòng)物管理水平。本公眾號后期也會(huì )就相關(guān)問(wèn)題展開(kāi)討論。

總之，雖然新版國標的修改未必盡善盡美，但對實(shí)驗動(dòng)物生產(chǎn)單位和使用單位而言，既提出了新的挑戰，也給予了新的機遇。科學(xué)地理解、認識和運用國標不僅能提升全行業(yè)的管理水平，也會(huì )在一定程度上促進(jìn)行業(yè)的科學(xué)發(fā)展，為我國生物醫藥研究和產(chǎn)業(yè)提供更好的保障。