類(lèi) 鼻 疽

實(shí)驗猴的國際貿易中，常常會(huì )在運輸和檢疫過(guò)程中遇到各種傳染病問(wèn)題，其中類(lèi)鼻疽就是近年來(lái)倍受?chē)H進(jìn)口商和疾控部門(mén)關(guān)注的一種傳染病。類(lèi)鼻疽是一種由革蘭氏陰性桿菌類(lèi)鼻疽伯克霍爾德菌（Pseudomonas pseudomallei）感染引起的疾病。這種疾病可以感染人類(lèi)、非人靈長(cháng)類(lèi)動(dòng)物、其他哺乳動(dòng)物、鳥(niǎo)類(lèi)和爬行動(dòng)物等。人類(lèi)鼻疽臨床表現多樣，極易漏診，從而延誤治療時(shí)機，通常感染后死亡率為10-50%，但如果發(fā)展為膿毒癥死亡率則可高達90%。東南亞地區、澳大利亞北部、我國海南、廣西、廣東等為疫源地，其中，東南亞地區發(fā)病率最高。

病 原 學(xué)

圖1  類(lèi)鼻疽伯克霍爾德菌純培養物

類(lèi)鼻疽伯克霍爾德菌屬于假單胞菌科，伯克霍爾德菌屬，菌體呈短桿狀，兩端濃染，其對營(yíng)養要求不高，在營(yíng)養缺乏的蒸餾水中也可存活數年，而且對大多數抗菌藥有耐藥性。常用消毒劑(如75%的乙醇、0.5%的碘伏、0.3%的氯己定和2%的84消毒液)能在3~10 min內迅速殺滅此菌。該菌在綿羊血瓊脂、麥康凱瓊脂、Ashdown瓊脂等多種培養基上均可生長(cháng)。于1912年被首次分離到，并于1921年將該菌所致疾病命名為類(lèi)鼻疽（Melioidosis）。根據《人間傳染的病原微生物名錄》（2023版）該菌的危害程度分類(lèi)和結核分枝桿菌、布魯氏菌等一樣同屬于第二類(lèi)，需要在BSL-2實(shí)驗室進(jìn)行樣本檢測，如果涉及活菌操作則要在BSL-3實(shí)驗室進(jìn)行。該菌現在也被美國CDC列為生物攻擊潛在病原體（B類(lèi)），是潛在的生化武器制劑。

流 行 病 學(xué)

該細菌常存在于熱帶地區的土壤和泥水中，常常在暴雨、洪水等天氣過(guò)后，通過(guò)攝入、吸入、開(kāi)放傷口、皮膚擦傷而感染人或動(dòng)物。而其在動(dòng)物與動(dòng)物、動(dòng)物與人及人與人之間相互傳播十分罕見(jiàn)。人感染后的潛伏期差異很大，從一天到幾年不等，但大多數情況下癥狀會(huì )在暴露后的1-21天內出現。動(dòng)物的潛伏期則不明確，但考慮到靈長(cháng)類(lèi)動(dòng)物與人類(lèi)的親緣關(guān)系很近，可以推斷非人靈長(cháng)類(lèi)動(dòng)物的潛伏期與人類(lèi)的潛伏期類(lèi)似。

隨著(zhù)全球氣候變化發(fā)生、交通便利，以及經(jīng)濟、貿易、文化交流的頻繁，類(lèi)鼻疽的人群感染率有逐年增長(cháng)趨勢。2015年，全球約有16.5萬(wàn)例相關(guān)病例，其中8.9萬(wàn)人死亡。已有越來(lái)越多原來(lái)不是疫源地的國家和地區出現本土病例，人群中出現更多感染病例的風(fēng)險正在擴大。而原產(chǎn)于東南亞的非人靈長(cháng)類(lèi)動(dòng)物在其本土及我國海南、廣西、廣東等地也都面臨著(zhù)同樣的風(fēng)險。

臨 床 癥 狀

類(lèi)鼻疽最大的特點(diǎn)是形成膿腫，特別常見(jiàn)于肺、肝、脾、骨骼肌和前列腺等。在東南亞三分之一的兒童感染病例都表現為腮腺膿腫。在澳大利亞北部，4%的患者表現為腦干腦炎。而在我國，血流感染是最常見(jiàn)的感染類(lèi)型，例如在我國主要疫源地海南，2012-2021年，從患者的各類(lèi)標本中分離到825株類(lèi)鼻疽伯克霍爾德菌，其中71.4%分離自血液樣本，且發(fā)病數量呈逐年遞增趨勢。

圖2 患類(lèi)鼻疽的食蟹猴肝臟、脾臟、肺、脊柱的病變

2021年1月，美國從柬埔寨進(jìn)口的一批食蟹猴在檢疫期對動(dòng)物進(jìn)行常規體檢時(shí)發(fā)現一只動(dòng)物的腰骶部有一個(gè)1 cm ×1 cm的皮下腫塊，在隨后的實(shí)驗室檢測中確認其為類(lèi)鼻疽伯克霍爾德菌感染所致的類(lèi)鼻疽病。這之后又從其它來(lái)自柬埔寨的進(jìn)口動(dòng)物中發(fā)現了5例病例，其中有4例是在完成隔離檢疫后才發(fā)病并被確診的。

治 療

類(lèi)鼻疽伯克霍爾德菌對常見(jiàn)抗菌素具有天然耐藥性，包括第一代內酰胺類(lèi)、氨基糖苷類(lèi)、大環(huán)內酯類(lèi)和氟喹諾酮類(lèi)藥物。

人的類(lèi)鼻疽治療包括兩個(gè)階段：

1.強化治療階段，頭孢他啶或碳青霉烯類(lèi)靜脈給藥至少10-14天；

2.根除治療階段，口服抗生素治療(甲氧芐啶/磺胺甲惡唑或強力霉素) 3-6個(gè)月。

 如果在停止治療時(shí)感染未完全清除，可能會(huì )復發(fā)。使用了不適當的抗生素或療程過(guò)短，類(lèi)鼻疽復發(fā)的可能性較大。即使是經(jīng)過(guò)規范的強化和根除治療后，人類(lèi)鼻疽患者依然有5% -28%的復發(fā)率。在動(dòng)物中，出于擔心人畜共患病傳播、治療時(shí)間過(guò)長(cháng)、還有復發(fā)的可能性及存在將該病原引入非流行地區的可能性等因素的考量，通常會(huì )將檢測陽(yáng)性動(dòng)物安樂(lè )死。

檢 測

在進(jìn)行診斷檢測時(shí)，最常用的方法是細菌分離培養和PCR檢測。需要注意的是，在使用生化鑒定時(shí)，現在市面上常用的商業(yè)鑒定數據庫可能會(huì )將類(lèi)鼻疽伯克霍爾德菌與洋蔥伯克霍爾德菌（B. cepacia）、泰國伯克霍爾德菌(B. thailandensis)等混淆。而在使用分子生物學(xué)方法時(shí)，如果直接用血液、環(huán)境樣本、組織進(jìn)行PCR檢測可能因菌量太小而發(fā)生漏檢。挑取純培養物進(jìn)行PCR擴增可以解決這一問(wèn)題。另外，如果用16sRNA測序，由于基因序列差異小，依然會(huì )和泰國伯克霍爾德菌發(fā)生混淆，而groEL基因有更好的鑒別效果。進(jìn)行鑒定檢測的實(shí)驗室必須充分了解類(lèi)鼻疽伯克霍爾德菌可能存在的漏檢、混淆的情況，在出現疑似病例時(shí)，應慎重對待，在做好生物安全防護的前提下使用可靠的鑒定方法。

結 語(yǔ)

雖然目前實(shí)驗猴的類(lèi)鼻疽伯克霍爾德菌感染比較少見(jiàn)，但對于那些來(lái)自疫源地的動(dòng)物，應該防范該致病菌感染所導致的高死亡率以及其所帶來(lái)的生物安全風(fēng)險。實(shí)驗猴養殖單位、進(jìn)口商、檢疫部門(mén)和使用單位應該對該病提高警惕，嚴格檢疫，定期監測，一旦遇到疑似案例應及時(shí)鑒定并果斷處理，切斷傳染途徑，減小擴散風(fēng)險。

參考文獻：

1. Sprague L D, Neubauer H. Melioidosis in animals: a review on epizootiology, diagnosis and clinical presentation[J]. Journal of Veterinary Medicine, Series B, 2004, 51(7): 305-320.

2. Johnson C H, Skinner B L, Dietz S M, et al. Natural infection of Burkholderia pseudomallei in an imported pigtail macaque (Macaca nemestrina) and management of the exposed colony[J]. Comparative Medicine, 2013, 63(6): 528-535.

3. White N J. Melioidosis[J]. The Lancet, 2003, 361(9370): 1715-1722.

4. Wiersinga W J, Virk H S, Torres A G, et al. Melioidosis[J]. Nature reviews Disease primers, 2018, 4(1): 1-22.

5. Taetzsch S J, Swaney E M, Gee J E, et al. Melioidosis in cynomolgus macaques (Macaca Fascicularis) imported to the United States from Cambodia[J]. Comparative Medicine, 2022, 72(6): 394-402.

6. 中國微生物學(xué)會(huì )醫學(xué)微生物學(xué)與免疫學(xué)專(zhuān)業(yè)委員會(huì ), 重慶市微生物學(xué)會(huì )臨床微生物專(zhuān)業(yè)委員會(huì ). 類(lèi)鼻疽診斷與治療專(zhuān)家共識 [J] . 中華傳染病雜志, 2022, 40(10) : 577-583. 

7. 段雪寒, 李詩(shī)佳, 吳華. 海南省589例類(lèi)鼻疽伯克霍爾德菌血流感染者流行病學(xué)及耐藥特征分析[J]. 中國熱帶醫學(xué), 2023,23(2): 126-130.