在進(jìn)行非臨床安全性評價(jià)中，實(shí)驗動(dòng)物常被用于了解靶器官毒性作用特征、劑量依賴(lài)性、與暴露量的關(guān)系以及潛在的可逆性（如適用）等實(shí)驗中。所得信息將被用于估算人體試驗的初始安全劑量和范圍，并確定臨床監測潛在不良反應的參數。而非臨床安全評價(jià)中的一個(gè)重要方面就是檢測受試物對動(dòng)物生殖系統的影響，這些研究通常在嚙齒類(lèi)動(dòng)物和兔上進(jìn)行。然而，對于許多生物藥品而言，嚙齒類(lèi)動(dòng)物和兔往往觀(guān)察不到與人類(lèi)相當的藥理學(xué)活性，則需使用非人靈長(cháng)類(lèi)動(dòng)物（NHP）來(lái)進(jìn)行測試。而對于這類(lèi)評價(jià)，需要求動(dòng)物達到性成熟，那如何來(lái)證明或者確認非人靈長(cháng)類(lèi)動(dòng)物已經(jīng)達到性成熟呢？

藥物安全性評估中最常用的NHP品系是食蟹猴（Macaca fascicularis）。食蟹猴最早生活于赤道附近，該地區沒(méi)有明顯的夏季和冬季，因此，它們一年四季都可以有活躍的的性活動(dòng)。此外，自然棲息于巴西的狨猴（Callithrix jacchus），偶爾也被用作生殖方面研究，但它們在預測潛在的睪丸或類(lèi)固醇激素相關(guān)內分泌效應方面的價(jià)值有限。而恒河猴（Macaca mulatta）很少用于生殖安全性研究，原因之一是其生育力具有明顯的季節性，并且生殖功能有約半年的時(shí)間都比較弱。因此本文將主要介紹食蟹猴的性成熟判定。

壹、雄性食蟹猴的性成熟

總體而言，食蟹猴的性成熟開(kāi)始時(shí)間很難預測，并且個(gè)體差異較大。一般認為來(lái)自毛里求斯的食蟹猴似乎比來(lái)自亞洲的食蟹猴更早成熟。

雄性食蟹猴的性成熟可以通過(guò)精子生成來(lái)判定，精子生成通常發(fā)生在骨骺閉合之前。精子生成的完成可以通過(guò)精液樣本中存在精子來(lái)證明，這也是雄性性成熟的推薦功能參數。射精的能力和精子的存在象征著(zhù)整個(gè)雄性生殖系統完全成熟。

除了通過(guò)精液樣本來(lái)判斷以外，年齡、體重或睪丸體積也可作為替代的判定指標。5歲5個(gè)月且體重5.3 kg 以上的動(dòng)物被認為與其睪丸成熟有90%的相關(guān)性。睪丸體積超過(guò)10mL 也能預示性成熟。用于測定睪丸體積的方法很重要。有研究表明，超聲測量比游標卡尺測量更準確。此外，睪丸重量在20g 以上也是睪丸成熟度的良好指標。雄性附屬生殖器官的成熟與睪丸成熟直接相關(guān)。當睪丸功能發(fā)育完全，即產(chǎn)生精子和睪酮時(shí)，這些器官就發(fā)育完全。組織學(xué)上，如果在曲細精管中觀(guān)察到完整的精子發(fā)生，并且在附睪中發(fā)現中等或大量的精子，則認為睪丸完全成熟。

促黃體激素（LH）、促卵泡素（FSH）、睪酮或抑制素B等激素的單次測量不是性成熟的可靠生物標志物。因為激素的分泌敏感性高，半衰期短，因此自體不同時(shí)期和個(gè)體間變異性較大，不過(guò)睪酮水平高于20nmol/L通常可反映食蟹猴的性成熟。

貳、雌性食蟹猴的性成熟

雌性食蟹猴性成熟最常見(jiàn)于至少4歲、體重至少2.5公斤的動(dòng)物，但與雄性一樣，存在一些不確定性。確認雌性食蟹猴性成熟最可靠的方法是通過(guò)評估月經(jīng)出血。食蟹猴卵巢周期（月經(jīng)周期）的整個(gè)持續時(shí)間為30（+5）天，月經(jīng)出血發(fā)生時(shí)間為1-8 天，平均4（+1）天。但當單獨飼養時(shí)，只有約50%的動(dòng)物表現出規則的月經(jīng)周期。而當合籠飼養時(shí)，高達80%的動(dòng)物可出現規律的月經(jīng)周期。值得注意的是，雌性食蟹猴在一起圈養時(shí)，月經(jīng)周期并不會(huì )同步。

雌性月經(jīng)可以通過(guò)每天采集陰道拭子來(lái)監測，當監測到2天及以上出血，并且至少間隔20天后能夠再次監測到出血時(shí)，說(shuō)明動(dòng)物達到性成熟水平。由于動(dòng)物出血時(shí)間可能較短，因此建議堅持每天采集陰道拭子，而不是間隔2-3天采集，不然很容易錯過(guò)月經(jīng)期。而評估會(huì )陰部皮膚腫脹和皮膚發(fā)紅并不是監測月經(jīng)周期性的可靠指標。原則上，也可以通過(guò)測量血清中黃體酮、17-B-雌二醇、LH 和 FSH的濃度來(lái)監測卵巢活動(dòng)周期，但是需要頻繁采血。因此，不建議僅通過(guò)激素分析的方式評估性成熟程度。

由此可見(jiàn)，評判食蟹猴是否性成熟是一個(gè)綜合的指標評價(jià)，不可僅靠單一的現象或因素來(lái)決定，使用這樣的方法更科學(xué)，從而才能使非臨床安全評價(jià)獲得的結果更可靠，更有價(jià)值。

參考文獻：

Mecklenburg, Lars., C. M. Luetiens, and G. F. Weinbauer.Toxicologic Pathology Forum*： Opinion on Sexual Maturity and Fertility Assessment in Long-tailed Macaques (Macaca fascicularis) in Nonclinical Safety Studies[J].Toxicologic pathology, 2019, 47(4):444-460.