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嚙齒類(lèi)動(dòng)物手術(shù)指導原則
1、背景
本文詳述了嚙齒類(lèi)動(dòng)物手術(shù)過(guò)程中需要遵守的操作原則,在IACUC方案中列出了相關(guān)替代流程的操作可除外。實(shí)驗研究者有責任確保動(dòng)物得到充足的麻醉/術(shù)后護理,提供護理的人員必須熟悉方案流程,同時(shí)具備進(jìn)行如下所示評估的技能和能力,并且必須能夠在發(fā)生術(shù)后并發(fā)癥時(shí)提供充足的獸醫支持。值得注意的是,以下的這些原則描述的均是最低標準。
2、麻醉和鎮痛
嚙齒類(lèi)動(dòng)物麻醉指南和要求需在嚙齒類(lèi)動(dòng)物麻醉護理的SOP中概述。除非有充足的理由,所有手術(shù)的鎮痛給藥應在術(shù)前或術(shù)中開(kāi)始,并持續至術(shù)后至少24小時(shí)。需要局部麻醉時(shí),應在組織切開(kāi)前注射局部麻醉劑,利多卡因在注射2-5min內起效,布比卡因在注射15min內起效。
3、手術(shù)區域準備
嚙齒類(lèi)動(dòng)物手術(shù)操作區域必須位于設施內不同時(shí)開(kāi)展其他活動(dòng)的區域。使用前該區域必須清潔并保持整潔,所有物品、設備表面均應清潔和消毒。
4、器械和創(chuàng )巾準備
手術(shù)前必須采用可接受的方法對手術(shù)器械進(jìn)行滅菌,方法包括高壓滅菌、環(huán)氧乙烷滅菌和特定的冷滅菌技術(shù),單獨使用酒精不是可接受的滅菌方法。
滅菌器的功能以及器械包的無(wú)菌性確認必須按照高壓滅菌器監測和無(wú)菌包裝儲存標準執行。
手術(shù)過(guò)程中,可使用熱珠滅菌器對器械進(jìn)行重復滅菌:使用無(wú)菌紗布擦拭器械上的所有有機材料后,將其放入微珠中30-45秒,此操作最多用于4只動(dòng)物的手術(shù)器械滅菌,后續就必須拆用新的手術(shù)器械包。
所有的植入物(微型泵、導管、縫合材料)必須無(wú)菌。
應使用無(wú)菌鋪巾覆蓋未剃毛的區域,鋪巾可接受的材料包括棉布、透明粘性鋪巾和大紗布方塊。另外還需建立手術(shù)器械的無(wú)菌區域,以防污染。
5、手術(shù)人員準備
所有手術(shù)人員必須戴口罩和手術(shù)帽,口罩將口鼻完全罩住,手術(shù)帽需將所有的頭發(fā)包裹。手部刷洗完畢后,穿無(wú)菌手術(shù)服,戴無(wú)菌手套(不能接觸手套的外表面)。整個(gè)過(guò)程保持器械和手套的無(wú)菌。
6、動(dòng)物準備
手術(shù)因麻醉時(shí)間、體腔暴露面積等原因,易出現術(shù)中體溫變化,需額外提供溫水毯等保溫措施。
雙眼涂抹眼膏,防止角膜干燥。
必須清除切口周?chē)鷧^域的所有毛發(fā),可以使用剃毛刀或脫毛膏(使用不當可導致皮膚的化學(xué)燒傷),脫毛的區域需要足夠大,以防器械或縫線(xiàn)接觸到未備好的皮膚。
對切口部位進(jìn)行手術(shù)部位準備:(注:僅用酒精不能滿(mǎn)足切口的消毒需求),從手術(shù)切口部位開(kāi)始向外旋轉,以環(huán)形方式,使用碘伏或氯己定紗布進(jìn)行消毒,每次使用后,丟棄紗布,重復至少三次。注意避免使用酒精等抗菌劑過(guò)度濕潤手術(shù)區域,可能會(huì )加劇體溫的丟失,造成低體溫。
7、切口閉合
必須至少分兩層閉合體腔(體壁和皮膚)。
為防止動(dòng)物撕咬傷口裂開(kāi),除非方案另有說(shuō)明,否則必須采用簡(jiǎn)單間斷縫合方式閉合傷口。
也可以使用傷口夾、組織膠閉合皮膚,注意涂膠過(guò)多是導致動(dòng)物自殘和傷口裂開(kāi)的常見(jiàn)原因。外部縫線(xiàn)必須是單股材料,以防止毛細作用及可能的傷口感染。
8、術(shù)后護理
動(dòng)物蘇醒后,將動(dòng)物送回籠中飼養,除非方案另有說(shuō)明。作為支持性治療計劃的一部分,可提前24-48小時(shí)將食物置于籠盒中。
研究人員應第二天一早檢查動(dòng)物狀態(tài),之后至少每天檢查一次,持續7-10天,直至拆除縫線(xiàn)或傷口夾,確保動(dòng)物可正常進(jìn)食、飲水、活動(dòng)和走動(dòng)。
檢查手術(shù)切口部位是否有透明或膿性分泌物、發(fā)紅、腫脹、動(dòng)物撕咬或傷口裂開(kāi)。
若出現感染、疝氣、器官功能障礙等并發(fā)癥,及時(shí)咨詢(xún)獸醫。除非方案中有描述,否則未經(jīng)獸醫人員確認,不允許進(jìn)行修復手術(shù)。事先未獲得批準而進(jìn)行的修復代表二次手術(shù)和不合規事件。
任何異常(例如脫水、嗜睡、食欲不振)均需要咨詢(xún)獸醫進(jìn)行支持治療,并持續頻繁的監測和護理。如果動(dòng)物得到了適當及時(shí)的治療,但癥狀持續惡化,則需要考慮對其進(jìn)行安樂(lè )。
9、記錄保存
必須保存每只或每籠動(dòng)物的手術(shù)記錄。建議使用手術(shù)記錄卡,信息包括日期、手術(shù)名稱(chēng)、使用的麻醉劑和鎮痛藥以及給藥時(shí)間、術(shù)后的監測記錄。動(dòng)物監測期間記錄卡必須固定在籠盒上,最終由實(shí)驗室按照相關(guān)法規作為永久記錄保存。
10、非存活手術(shù)
建議提供額外的熱量來(lái)穩定動(dòng)物的麻醉狀態(tài),但不做嚴格要求。
所有的手術(shù)器械和植入物必須潔凈,但不一定無(wú)菌。對于>4小時(shí)的長(cháng)時(shí)間手術(shù),建議使用無(wú)菌器械,以避免與細菌污染相關(guān)的炎癥。
手術(shù)區域必須剔除毛發(fā),但該部位不需要無(wú)菌清洗。
術(shù)者可以穿戴新的檢查手套,而非無(wú)菌手套。
參考文獻:
Principles of Rodent Surgery. IACUC of WAYNE STATE UNIVERSITY. 12/2019